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FITC標記牛血清白蛋白標定方法

發布時間: 2020-10-29  點擊次數: 968次

FITC標記牛血清白蛋白標定方法


牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。


牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含己糖和己糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430 Da,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為Blocking agent。

 

標記材料:

1、異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)異構體I(isomer I),來源于sigma,MW:389.4,激發波長 493nm,發射波長 550nm。

2、牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin ,BSA),進口分裝,MW: ~68000,純度98%。

3、標記緩沖液:0.5M pH9.5 CB(碳酸鹽緩沖液),洗脫液:0.01M pH7.2 PBS。

標記方法:

直接標記法:RT 2.5-3.0hs,離心后過Sephadex G-50,0.01M pH7.2 PBS洗柱。

質量分析:

溶液為0.01M pH7.2 PBS(含0.03%proclin,50%甘油),蛋白濃度為5mg/ml左右,FITC濃度為30-45ug/ml,含有防腐劑。

FITC標記牛血清白蛋白進口分裝,現貨供應

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