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明膠酶譜試劑盒這樣染色才正確!

發布時間: 2019-10-08  點擊次數: 748次

明膠酶譜試劑盒這樣染色才正確!




明膠酶譜分析試劑盒(matrix metalloproteinase, MMP)以無活性的酶原形式分泌,活化后能夠降解細胞外基質的膠原蛋白,又稱膠原酶。通過影響細胞外基質,膠原酶參與胚胎發育、形態發生、組織重塑等過程,并參與炎癥、腫瘤、心血管、神經等許多疾病過程。明膠酶譜法試劑盒!


常規考馬斯亮藍SDS-PAGE 凝膠蛋白質染色是實驗室常用的凝膠染色方法。銀染方法雖然靈敏度高,但所需試劑復雜并且有毒有害,操作步驟繁瑣,難以控制獲得好的染色效果。

 

 

染色步驟:

 

1. 此染色液即為工作液,使用時直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養皿中以考馬斯亮藍染色液覆蓋凝膠,并緩慢搖動2h;

 

2. 傾去染色液,用脫色液沖洗凝膠;

 

3. 以脫色液覆蓋凝膠,緩慢搖動2h,傾去脫色液,再加入新脫色液進行脫色,直至獲得清晰的藍色的條帶和干凈的背景(通常此過程需要2~4h,也可脫色過夜至清晰的藍色的條帶和干凈的背景);

 

4. 對凝膠進行分析和照相,凝膠可放置在7%的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置(P2000)對凝膠進行處理后保存。

 

安全性:含有甲醇,無特殊毒性,按一般化學品操作規程處理。

 

.參考文獻:

 

1. Nagase H and Woessner JF. Matrix Metalloproteinases. J Biol Chem, 1999, 274, 21491-21494

 

2. Heussen C, and Dowdle EB. Electrophoretic analysis of plasminogen activators in polyacrylamide

 

gels containing sodium dodecyl sulfate and copolymerized substrates. Anal. Biochem,1980, 102,196–202

3.綠茶多酚EGCG增強動脈粥樣硬化斑塊穩定性及其相關機制研究



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