雙鏈DNA 變性緩沖液尤其適用于Southern blot 實(shí)驗(yàn)

雙鏈DNA 變性緩沖液又稱為中性轉(zhuǎn)移緩沖液，由1.5M NaCl 、微量NaOH 等組成，不含蔗糖，可用于核酸雜交等，尤其適用于Southern blot 實(shí)驗(yàn)。本試劑僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于診斷或其他用途。

規(guī)格：100ml/500ml

保存：室溫

有效期：12個(gè)月

用途：又稱為中性轉(zhuǎn)移緩沖液,常用于雜交

說明：由氯化鈉、堿水組成。

使用緩沖液時(shí)應(yīng)注意的一些事項(xiàng)

1.向緩沖液中添加一些必要的穩(wěn)定劑(如巰基保護(hù)劑——乙醇、多元醇、甘油、蔗糖、乙二醇、DDT等),以保護(hù)生物大分子重要的活性基團(tuán)或空間結(jié)構(gòu)。

2.添加金屬離子或絡(luò)合劑,以保護(hù)對(duì)金屬離子敏感(需要或不需要)的生物大分子。有些酶需要兩價(jià)的金屬離子(如Ca++,Mg++,Mn++等)作為其輔因子;有些生物大分子則要時(shí)刻防范上述酶類(如DNase,Nuclease等)對(duì)它們的降解,故要向緩沖液中添加EDTA或EGTA 等螯合劑,以保護(hù)它們不被降解。

3.添加蛋白酶抑制劑。如我們要研究蛋白質(zhì)分子,在分離純化他們的過程中,必須時(shí)刻防止他們被蛋白酶所水解。為此可向緩沖液中添加PMSF或DFP(磷酸二異丙基氟),亮抑肽等。它們可分別抑制哺乳動(dòng)物蛋白酶或絲氨酸蛋白酶的活力。

4.蛋白質(zhì)添加劑:生物大分子需要有一定的濃度,才能保持其完整的空間構(gòu)像。因此,經(jīng)過一系列分離純化步驟而終得到純酶制品時(shí),有時(shí)其濃度很低。為保持這類濃度很稀的純酶的活力,往往要向這類酶制品(特別是一些商售的限制性核酸內(nèi)切酶)中人為地添加一些蛋白質(zhì),如牛血清白蛋白(BSA)或酪蛋白(Casein)等,從而既保護(hù)了目的酶的空間構(gòu)象又不影響其活力。