MTT細胞增殖檢測試劑盒多能檢測多少樣本

MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結晶形成的量與細胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經(jīng)濟。

產(chǎn)品簡介：
MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan，在特定溶劑存在的情況下，可以被*溶解，然后通過酶標儀可以測定490nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。

使用說明：
1.收集對數(shù)期細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，分于96孔板，每孔180μL，3000-10000個細胞/孔。
2.置37℃、5%CO2溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁，培養(yǎng)6-24小時。
3.加入適當濃度的受試化合物，繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。
4.小心吸去上清，加入90μL新鮮培養(yǎng)液，再加入10μL MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4 h。
5.然后吸掉上清，每孔加入110μL Formazan溶解液，置搖床上低速振蕩10 min，使結晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490 nm處測量各孔的吸光值。
6.同時設置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT、 Formazan溶解液），對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan溶解液），每組設定3復孔。

注意事項：
1.由于使用96孔板進行檢測，如果細胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
2.MTT溶液為黃色需避光保存，長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。Formazan溶解液結凍或產(chǎn)生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。

2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和kou罩操作。

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